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本制品是特别针对通过PCR方法研究基因组DNA甲基化特点的客户所开发的试剂盒。试剂盒组分简单，包含MSP DNA Polymerase，10×MSP PCR Buffe和dNTPs。其中，MSP DNA Polymerase是采用抗体修饰的耐热聚合酶，10×MSP PCR Buffer是特别为MSP反应所优化的PCR缓冲液。本产品具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。适于与我司重亚硫酸盐处理试剂盒(货号：WH0232)搭配使用。

表观遗传学是研究基因的核苷酸序列不发生改变的情况下，基因表达和调控的可遗传变化的一门遗传学分支学科。表观遗传的现象很多，比如RNA介导的基因沉默、组蛋白修饰等。在高等真核生物中一个主要的表观遗传学机制是DNA的甲基化。

组分	规格
MSP DNA Polymerase(2.5U/μL)	160μL
10×MSP PCR Buffer	1mL
dNTPs(2.5mM)	1mL

保存：-20℃，有效期12个月


10×MSP PCR Buffer：
500mM Tris-HCl (pH8.8)，200mM KCl，15mM MgCl₂，其它稳定剂和增强剂


SDS-PAGE检测纯度大于99%；经检测无外源核酸酶活性；能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因；室温存放一周，无明显活性改变。


本产品使用方便快捷，能避免PCR操作过程中的污染，使用时只需取适量MSP DNA Polymerase，10×MSP PCR Buffer和dNTPs，同时加入模板和引物，并加入ddH2O补足体积，使MSP PCR Buffer的浓度为1×即可进行反应。


本产品适用于甲基化特异性PCR（MSP）方法分析基因组DNA的甲基化特点。


注意：以下举例仅供参考，实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异，需根据实际情况，设定最佳反应条件。

• 使用甲基化特异性PCR试剂盒，以重亚硫酸盐处理后的基因组DNA为模板，扩增400bp的片段，反应体系为20μL。
  

  成分	用量
  Template	＜500ng
  Primer 1(10μM)	1μL
  Primer 2(10μM)	1μL
  dNTPs(2.5mM)	1.6μL
  MSP DNA Polymerase(2.5U/μL)	1U
  10×MSP PCR Buffer	2μL
  ddH2O	至20μL

  
  
• PCR反应循环的设置：
  

  温度	时间	循环数
  95	5min	1
  94	20sec	35
  60	30sec
  72	20sec
  72	5min	1

  
  
• 结果检测：反应结束后取10μL反应产物，琼脂糖凝胶电泳检测。
  注意：反复冻融的DNA模板会影响扩增，尽量不要反复冻融DNA模板进行；如需多次实验，可分装后进行冻存，减少冻融次数。

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